由于 ADF法和NDF法不能測定食品中的可溶性膳食纖維含量，人們根據Trowell等對膳食纖維的定義模仿食物在消化道的消化過程提出了酶法分析。樣品分別利用α-淀粉酶、蛋白酶和葡萄糖苷酶進行酶解消化，除去蛋白質和淀粉。在ASP和Prosky等來自29個國家43個實驗室的學者的共同努力下，提出了比較完整的酶 - 重量法，并被 AOAC、AACC 等機構采納為AOAC 法和 AACC 法并進一步成為 F D A 和 WHO/FAO等承認的通用方法。

該方法的優點在于能同時分析出樣品中可溶性與不溶性膳食纖維的含量，且分析設備少。但過程比較復雜，影響因素多，操作不方便且成本高，后又被Lee&Prosky等改良成為操作比較簡單的方法，該方法被推薦為 AOAC/AACC 共同的分析測定方法。酶法分析膳食纖維除酶重量法外，比較常用的還有以Englyst法和Uppsala為主的酶一化學法。

該法是用淀粉酶除去淀粉，再用酸把膳食纖維水解成單糖，然后用比色法、GLC 或 HPLC 測定單糖組成和含量，該法能快速、準確地測定總膳食纖維、可溶性膳食纖維和不溶性膳食纖維，并能確定組成膳食纖維的單糖成分，為分析不同膳食纖維生理功能提供了有效的手段。但是，該法是建立在把膳食纖維定義為非淀粉多糖的基礎上，因而不能測定木質素、多酚化合物、纖維醇等膳食纖維，所以該法只在英國等少數歐盟國家使用并逐漸被酶一重量法代替。